שאלה | נרצה לבחון את התפתחות התגובה החיסונית כנגד אנטיגן gp100 בשיטה Dot Blot. איך ניתן להסביר את התוצאות שהתקבלו לאחר הוספת הסובסטרט (היעזרו בתמונה)?

נרצה לבחון את התפתחות התגובה החיסונית כנגד אנטיגן gp100 בשיטה Dot Blot. איך ניתן להסביר את התוצאות שהתקבלו לאחר הוספת הסובסטרט (היעזרו בתמונה)?

שאלה #127379

		שש טיפות זהות של gp100 הוטענו על הממברנה. לאחר שלב החסימה, הטיפות בטור 1 הודגרו עם סרום ארנבת לאחר שתי מנות חיסון, הטיפות בטור 2 הודגרו עם סרום ארנבת לאחר מנת חיסון אחת והטיפות בטור 3 הודגרו עם סרום ארנבת שלא חוסנה כלל. בשלב האחרון הודגרו כל הדוגמאות עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgG-HRP.
		שש טיפות זהות של gp100 הוטענו על הממברנה. לאחר שלב החסימה, הודגרה כל הממברנה עם סרום ארנבת שקיבלה מנת חיסון בודדת. בשלב האחרון, הטיפות בטור 1 הודגרו עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgG-HRP, הטיפות בטור 2 הודגרו עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgM-HRP והטיפות בטור 3 הודגרו עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgD-HRP
		שש טיפות זהות של gp100 הוטענו על הממברנה. לאחר שלב החסימה, הודגרה כל הממברנה עם סרום ארנבת שקיבלה שתי מנות חיסון. בשלב האחרון, הטיפות בטור 1 הודגרו עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgG-HRP, הטיפות בטור 2 הודגרו עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgM-HRP והטיפות בטור 3 הודגרו עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgE-HRP.
		הטיפות בטור 1 הודגרו עם סרום ארנבת לאחר שתי מנות חיסון, הטיפות בטור 2 הודגרו עם סרום ארנבת לאחר מנת חיסון אחת והטיפות בטור 3 הודגרו עם סרום ארנבת שלא חוסנה כלל. בשלב האחרון הודגרו כל הדוגמאות עם נוגדן שניוני נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgE-HRP.
		בטור 1 הוטענו 500μl של gp100, בטור 2 הוטענו הטיפות ב 250μl של gp100 ובטור 3 הוטענו הטיפות ב 100μl של gp100. לאחר שלב החסימה, הודגרה הממבראנה כולה עם סרום ארנבת לאחר שתי מנות חיסון ובשלב האחרון הודגרו כל הדוגמאות עם נוגדן שניוני Goat anti Rabbit IgG-HRP.