שאלה | TIRFM היא שיטה בה אפשר לראות רק את הפלואורופורים שקרובים מאוד למשטח הזכוכית (מרחק של ~200nm ) ולכן היא מאפשרת חיתוך אופטי שהוא טוב בסדרי גודל מזה של מיקרוסקופ אור רגיל ואף של מיקרוסקופ קונפוקאלי. על איזו תופעה פיזיקאלית שיטה זו מתבססת?

TIRFM היא שיטה בה אפשר לראות רק את הפלואורופורים שקרובים מאוד למשטח הזכוכית (מרחק של ~200nm ) ולכן היא מאפשרת חיתוך אופטי שהוא טוב בסדרי גודל מזה של מיקרוסקופ אור רגיל ואף של מיקרוסקופ קונפוקאלי. על איזו תופעה פיזיקאלית שיטה זו מתבססת?

		1) הארה בעוצמה חזקה עד כדי כך שההסתברות ששני פוטונים יגיעו לאותו פלואורופור באותו הזמן היא לא זניחה, ולכן מתקבלת "הכפלה" של האנרגיה
		2) החזרה מוחלטת של האור ויצירת evanescent field במעבר בין הזכוכית (n=1.5) לבין המדיום המימי בו נמצאים התאים (n=1.33)
		3) שימוש בקרן סורקת נוספת במקביל לעירור, שגורמת ל depletion של הפלואורסנציה ועליה ברזולוציה בכל הצירים (XYZ)
		4) שימוש בשיטה חישובית ש"מקלפת" את המידע שנישא ע"י האור שמגיע ממישורי פוקוס אחרים

מיין לפי